東京理化EYELA在普洱茶茶褐素分離研究的應(yīng)用

為了了解解普洱茶茶褐素的組成，對(duì)從普洱茶中提取的茶褐素進(jìn)行了分離。通過(guò)比較不同樹(shù)脂對(duì)茶褐素的吸附與解吸能力，選擇AB－8 大孔樹(shù)脂對(duì)普洱茶茶褐素進(jìn)行分離，得到TBsP1 和TBsP2 兩個(gè)組分; 進(jìn)一步利用DEAE－52 纖維素柱對(duì)TBsP1 組分進(jìn)行分離，得到6 個(gè)組分; 對(duì)茶褐素組分TBsP1、TBsP2 以及TBsP1 分得到的6 個(gè)組分的總糖、總酚和蛋白質(zhì)的含量進(jìn)行了分析，并進(jìn)一步對(duì)各組分的單糖組成進(jìn)行了分析。

    普洱茶是我國(guó)*的，采用云南大葉種曬青毛茶經(jīng)渥堆發(fā)酵制成，渥堆發(fā)酵過(guò)程中，茶多酚在微生物作用及濕熱作用下被氧化成茶黃素、茶紅素，茶黃素和茶紅素進(jìn)一步氧化聚合，并結(jié)合多糖、蛋白質(zhì)、脂質(zhì)等化合物形成茶褐素。茶褐素能溶于水而不溶于乙酸乙酯和正丁醇，是一類(lèi)十分復(fù)雜的化合物，具有抗癌、減肥降脂、抗疲勞等活性功能，化學(xué)組成及結(jié)構(gòu)有待探明。

    目前關(guān)于茶黃素的研究為深入，已制備得到多種茶黃素單體，茶紅素的研究也取得一定進(jìn)展，茶褐素則由于其組成、結(jié)構(gòu)復(fù)雜，極性很大，分離純化的難度高，其研究進(jìn)展緩慢。等利用原子力顯微鏡對(duì)不同分子量的茶褐素進(jìn)行觀察，發(fā)現(xiàn)不同分子量的茶褐素粒子形貌并不均一。利用硅膠層析對(duì)茶褐素進(jìn)行分離，發(fā)現(xiàn)茶褐素為多羥基物質(zhì)，含有烷基、羧基及苯環(huán)，主要的糖單位為葡萄糖。等利用sephadex－LH20 對(duì)茶褐素進(jìn)行分級(jí)，得到六個(gè)級(jí)分，這些級(jí)分由兒茶素以外的多酚、蛋白質(zhì)及多糖組成，但是各組分中總酚、總糖和蛋白質(zhì)含量不同。

    儀器：N－1100 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀日本東京理化; UV5200

    本文通過(guò)利用AB－8 樹(shù)脂將茶褐素分離成兩種不同的極性的組分，兩個(gè)組分總糖、總酚、蛋白質(zhì)含量不同，TBsP1 中多糖含量較高，TBsP2 中總酚含量高。兩組分的單糖組成上也有區(qū)別尤其是GalA 和Glc 的摩爾百分比差異較大。TBs－P1 組分經(jīng)DEAE－52 分離后得到六種不同性質(zhì)的組分，各個(gè)組分總糖、總酚和蛋白質(zhì)含量均有區(qū)別，說(shuō)明經(jīng)過(guò)AB － 8 樹(shù)脂和DEAE－52 樹(shù)脂分步層析分離，可以將不同性質(zhì)的茶褐素組分進(jìn)行分離。不同組分中多糖、多酚和蛋白質(zhì)的結(jié)合程度也有所不同。茶褐素的主要分離組分單糖組成相似，各種單糖的摩爾百分比有差別，但與曬青毛茶相比差異較大，說(shuō)明普洱茶發(fā)酵過(guò)程中，原料的糖類(lèi)物質(zhì)經(jīng)微生物作用發(fā)生變化，并與多酚和蛋白質(zhì)結(jié)合形成了茶褐素。有關(guān)普洱茶發(fā)酵過(guò)程中茶褐素形成方式、單糖組成的變化，各組分的結(jié)構(gòu)特定、生理活性等還有待研究。